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国产液相色谱按两相间分离机理可分为哪些?

2022-11-24 16:18:46  来源: 青岛盛瀚官网

国产液相色谱的类型按组分在两相间分离机理的不同主要分为液-固吸附色谱法、液-液分配色谱法、化学键合相色谱法、离子交换色谱法和凝胶色谱法等。
 

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  1.液-固吸附色谱法
 

  液-固吸附色谱法(LSC)是以固体吸附剂为固定相,吸附剂表面的活性中心有吸附能力,试样分子被流动相带入柱内时,它将与流动相溶剂分子在吸附剂表面发生竞争性吸附。
 

  目前经常使用的吸附剂有硅胶、氧化铝、分子筛(极性)和活性炭(非极性)等,以硅胶较为常用。
 

  液-固吸附色谱法的流动相可以是各种不同极性的一元或多元溶剂。其分离原理是组分在两相间经过反复多次的吸附与解吸附分配平衡。
 

  液-固吸附色谱法选择流动相的原则是:极性大的样品需用极性强的洗脱剂,极性弱的样品宜用极性较弱的洗脱剂。
 

  液-固吸附色谱法选择性好,较大允许进样量较大,在分离几何异构体、族分离和制备色谱方面具有*的意义。液-固色谱还可用于分离偶氮染料、维生素、甾族化合物、多核苷芳烃、脂肪、油类、极性较小的植物色素等。
 

  2.液-液分配色谱法
 

  液-液分配色谱法(LLC是根据物质在两种互不相溶(或部分互溶)的液体中溶解度的不同而实现分离的方法。通过在担体(载体)上涂渍一薄层固定液制备固定相,与流动相一起构成液-液两相,根据各组分在两相间分配系数的不同,经反复多次分配平衡而实现分离。
 

  根据固定相和流动相之间相对极性的大小,可将分配色谱法分为两类。流动相极性小而固定相极性大的称为正相分配色谱法,常用于分离强极性化合物;流动相极性大而固定相极性小的称为反相分配色谱法,适于分离弱极性的化合物。
 

  分配色谱法的固定相由载体和固定液组成。载体的材料可以是惰性的玻璃微球,也可以是吸附剂。常用的固定液只有几种极性不同的物质,如聚乙二醇、聚酰胺、正十八烷和异三十烷等。
 

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  分配色谱法中所用流动相的极性必须与固定相显著不同,以避免固定相溶解于流动相而流失。一般原则是:若用极性较强的或亲水性物质为固定相,应以极性较弱的或亲脂性溶剂为流动相;若用非极性或亲脂性物质为固定相,则应以极性较大的或亲水性溶剂为流动相。选择流动相一般根据实验来选择,正相色谱法常用低极性溶剂,如烃类,加入适量极性溶剂如氯仿、醇类,以调节洗脱强度。反相色谱法的流动相多以水或无机盐缓冲液为主体,加入甲醇、乙腈等调节极性。梯度洗脱时,正相色谱法通常逐渐增大洗脱剂中极性溶剂的比例,而反相色谱法则与之相反,逐渐增大甲醇和乙腈的配比。
 

  3.化学键合相色谱法
 

  化学键合即用化学反应的方法通过化学键将固定液结合在载体表面。采用化学键合相的液相色谱法称为化学键合相色谱法,简称键合相色谱。键合固定相非常稳定,在使用中不易流失,适于梯度洗脱。由于键合到载体表面的官能团可以是各种极性的,因此它适用于各种样品的分离测定。用来制备键合固定相的载体,几乎都用硅胶。通常反应发生在硅胶表面的硅醇基(≡Si-OH)上,形成硅氧碳键型(≡Si-O-C)、硅氧硅碳型(≡Si-O-Si-C )、硅碳型(≡Si-C)和硅氮型(≡Si-N)四种类型,其中以硅烷化键合反应(硅氧硅碳型)较为常用,如十八烷基键合硅胶柱(简称碳十八柱,ODS柱),它是高效液相色谱法较为理想的固定相。




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